热带病与寄生虫学 ›› 2019, Vol. 17 ›› Issue (3): 140-142,,130.

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SJIR-2 基因真核表达载体的构建及在真核细胞内表达的研究

王正印,尹元,陆群   

  1. 200082 上海市,上海中医药大学附属上海市中
    西医结合医院检验科
  • 出版日期:2019-09-10 发布日期:2019-12-03
  • 基金资助:

    上海市卫生计生委青年项目(20174Y0016)

  • Online:2019-09-10 Published:2019-12-03

摘要: 目的 构建 SJIR - 2 基因的真核表达载体,检测该基因在真核细胞内的表达,为进一步研究该 基因作为血吸虫免疫疫苗打下基础。 方法 PCR 反应扩增出目的基因 SJIR - 2 后插入到真核表达载体 pEG FP 中,双酶切鉴定并进行序列测定,以脂质体介导的方法转染 293T 细胞,再以 Western blot 方法检测该基因 的编码蛋白在 293T 细胞内的表达情况。 结果 PCR 反应扩增出目的基因 SJIR - 2,构建了 pEGFP - SJIR - 2 真核表达载体,双酶切鉴定插入片段大小正确,DNA 测序结果与 GeneBank 中的 SJIR - 2 基因序列同源性为 100% ,重组基因成功转染进 293T 细胞中,Western blot 检测出该蛋白在 293T 细胞内的表达。 结论 成功构 建了 pEGFP - SJIR - 2 真核表达载体,该基因编码的蛋白可以在真核细胞内表达,为我们进一步探索 SJIR - 2 基因的重组疫苗在血吸虫病防治中的作用打下基础。

关键词: SJIR-2基因, 真核表达载体, 疫苗